手性藥物

農藥對映體

氨基酸異構體

9. 混合模式色譜柱技術

一根柱子同時具有多種保留機制。

例如：

反相 + 離子交換

HILIC + 離子交換

反相 + π-π 作用

疏水 + 靜電作用

適用：

復雜樣品

強極性/弱保留化合物

雜質譜分析

藥物有關物質分析

二、按填料材料分類

1. 硅膠基質色譜柱

最常見。

優點：

柱效高；

機械強度好；

表面易修飾。

缺點：

pH 適用范圍有限，通常約 pH 2–8 或 2–10。

2. 有機聚合物基質色譜柱

例如聚苯乙烯-二乙烯苯、甲基丙烯酸酯等。

優點：

耐酸堿范圍寬；

適合生物大分子和離子交換。

缺點：

柱效通常低于高性能硅膠柱。

3. 雜化顆粒色譜柱

例如有機-無機雜化硅膠。

優點：

耐高 pH；

機械強度好；

柱壽命較長。

適合：

高 pH 方法；

堿性藥物分析；

方法開發。

4. 石墨化碳柱

例如 PGC 柱。

特點：

保留強；

對極性化合物、結構異構體有特殊選擇性。

適用：

糖類；

極性代謝物；

幾何異構體。

三、按顆粒技術分類

1. 全多孔顆粒柱

傳統最常見。

特點：

載樣量好；

應用廣；

柱效穩定。

2. 核殼顆粒柱

也叫表面多孔顆粒柱。

特點：

柱效高；

背壓低于同等柱效的小粒徑全多孔柱；

適合快速分析。

3. 亞 2 μm 超高效色譜柱

用于 UHPLC。

特點：

分離效率高；

分析速度快；

背壓高；

需要耐高壓儀器。

4. 單分散顆粒柱

顆粒粒徑分布非常窄。

特點：

柱床更均一；

柱效和重現性較好。

四、按柱結構分類

1. 常規填充柱

最常用 HPLC/UPLC 柱。

2. 毛細管柱

常用于微流量 LC、納升級 LC-MS。

適用：

蛋白組學；

微量樣品；

高靈敏質譜分析。

3. 整體柱/Monolithic Column

固定相為連續多孔結構。

特點：

通透性高；

背壓低；

適合快速分離大分子。

4. 制備柱

用于純化和放大。

特點：

柱內徑大；

載樣量高；

用于藥物、中間體、多肽、天然產物純化。

5. 保護柱

安裝在分析柱前端。

作用：

截留顆粒和強污染物；

延長分析柱壽命。

五、按應用領域分類

應用方向 常用柱技術

小分子藥物 C18、C8、Phenyl、PFP、HILIC

多肽 寬孔 C18、C8、C4

蛋白質 SEC、離子交換、C4、親和柱

氨基酸 C18 衍生法、離子交換、HILIC

糖類 氨基柱、HILIC、離子色譜、PGC

聚合物 GPC/SEC

無機離子 離子色譜柱

手性藥物 手性色譜柱

抗體/mAb Protein A、SEC、IEX、HIC

環境樣品 C18、離子色譜、HILIC

食品檢測 C18、氨基柱、離子色譜、HILIC

六、常見特殊色譜柱技術

1. HIC 疏水相互作用色譜

常用于蛋白、抗體分離。

2. RP 寬孔生物柱

常用于多肽、蛋白、寡核苷酸。

3. 寡核苷酸分析柱

常見模式：

離子對反相；

陰離子交換；

HILIC。

4. 超惰性色譜柱

通過表面處理降低金屬吸附和硅醇基活性。

適用：

堿性化合物；

磷酸化合物；

多肽；

金屬敏感樣品。

5. 耐高 pH 色譜柱

適用于高 pH 條件下改善堿性化合物峰形或改變選擇性。